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交叉配血試驗簡介

交叉配血試驗包括主試驗和副試驗兩種。前者用受血者血清與供血者紅細胞懸液作試驗以發(fā)現(xiàn)受血者血清中是否含有與供血者紅細胞反應(yīng)的抗體。又稱直接配合或主側(cè)配合;后者則用供血者血清與受血者紅細胞作試驗以發(fā)現(xiàn)供血者血清中是否有不合抗體，又稱間接配合。

臨床意義

在血型鑒定的基礎(chǔ)上，通過交叉配血試驗進一步證實受血者和供血者之間不存在血型不合的抗原一抗體反應(yīng)，以保證受血者的輸血安全。因輸血直接涉及病人的生命安全，故病人與獻血員雖屬同一血型也應(yīng)進行交叉配血。

交叉配血是確定能否輸血的重要依據(jù)，兩側(cè)均不凝集可輸血。若獻血人紅細胞與受血人血清(主側(cè))發(fā)生凝集應(yīng)禁止輸血;主側(cè)不凝集，次側(cè)(獻血人血清與受血者紅細胞)凝集，必要時可少量、慢速輸血。

交叉配血不能只進行鹽水介質(zhì)交叉配血，在條件差的實驗室也應(yīng)該進行膠體介質(zhì)配血，以盡量消除不完全抗體存在的危害，減少輸血引起的不良反應(yīng)。

背景原因

ABO血型是根據(jù)紅細胞膜上存在的凝集原A與凝集原B的情況而將血液分為4型。

凡紅細胞只含A凝集原的，即稱A型;如存在B凝集原的，稱為B型;若A與B兩種凝集原都有的稱為AB型;這兩種凝集原都沒有的，則稱為O型。

不同血型的人的血清中各含有不同的凝集素，即不含有對抗內(nèi)他自身紅細胞凝集原的凝集素。在A型人的血清中，只含有抗B凝集素;B型人的血清中，只含有抗A凝集素;AB型人的血清中沒有抗A和抗B凝集素;而O型人的血清中則含有抗A和抗B凝集素。

在ABO系統(tǒng)血型相同的人之間進行輸血，在輸血前必須進行交叉配血試驗(cross-match test)，即不僅把供血者的紅細胞與受血者的血清進行血清配合試驗(這稱為試驗主側(cè));而且要把受血者的紅細胞與供血者的血清作配合試驗(這稱為試驗的次側(cè))。

這樣，既可檢驗血型測定是否有誤，又能發(fā)現(xiàn)他們的紅細胞或血清中，是否還存在一些其它的凝集原或凝集素，足以引起紅細胞凝集反應(yīng)。在進行交叉式配血試驗時，應(yīng)在37℃下進行，以保證可能有的凝集反應(yīng)得以充分顯示。

試驗方式

交叉配血試驗有多種方式，如鹽水法、酶技術(shù)配血法、膠體介質(zhì)配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。

微柱凝膠試驗微柱凝膠試驗(Microtubes Gel Test，MGT)是20世紀(jì)90年代先后進入國內(nèi)實驗室并用于交叉配血的新方法。在一些先進國家已成為常規(guī)的紅細胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)。而凝聚胺用于不完全抗體的測定與鑒定以及交叉配血等血清學(xué)試驗也已在國內(nèi)迅速推廣使用。該方法簡便、時間短、結(jié)果明顯。

材料和試劑

診斷用人血型抗A血清、診斷用人血型抗B血清(常在血清中加入不同顏色的染料以示區(qū)別，如A型紅色，B型藍色)、生理鹽水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%紅細胞懸液、受血者的2%紅細胞懸液。

器具

凹玻片或載玻片、小試管、尖嘴滴管、無菌刺血針、牙簽、酒精棉球、無菌干棉球、試管架、顯微鏡、記號筆等。

操作過程

1、首先準(zhǔn)備好受血者和獻血者的血樣。

2、分別用生理鹽水配好用受血者2·5%的紅細胞鹽水懸液、獻血者2·5%紅細胞鹽水懸液。

3、主側(cè)加受血者血清0.5ml，獻血者紅細胞鹽水懸液0.5ml。

4、次側(cè)加獻血者血清0.5ml，受血者紅細胞鹽水懸液0.5ml。

5、混勻后，根據(jù)所用交叉配血方式，如酶技術(shù)配血法，可在37度水浴箱孵育1小時后，直接觀察有無凝集或溶血;若選用鹽水介質(zhì)等方法，則需1000rpm離心1min;或選用一定的速度離心相應(yīng)的時間，如聚凝胺試劑提供的轉(zhuǎn)速和時間。

結(jié)果觀察

先觀察上清液的顏色，然后再輕搖試管觀察有無紅細胞凝集現(xiàn)象發(fā)生;

結(jié)果判定:如試管內(nèi)紅細胞呈均勻混濁無顆粒出現(xiàn)即無凝集，上清液呈正常血清狀顏色為交叉配血試驗相合。如上清液呈紅色即有溶血現(xiàn)象，紅細胞成塊即為凝集現(xiàn)象，為交叉配血試驗不相合

正常范圍

主試驗和副試驗均不出現(xiàn)凝集(也不溶血)即說明受血者和供血者ABO血型相配。

主試驗和副試驗都不出現(xiàn)凝集和溶血現(xiàn)象才可輸血。如果交叉配血試驗的兩側(cè)都沒有凝集反應(yīng)，即為配血相合，可以進行輸血;

若獻血人紅細胞與受血人血清(主側(cè))發(fā)生凝集應(yīng)禁止輸血，則為配血不合，其血絕對不可輸入。

主試驗不發(fā)生凝集，副試驗發(fā)生凝集，可適當(dāng)少量輸血 (不宜超過200ml)。輸血時不宜太快太多，并密切觀察，如發(fā)生輸血反應(yīng)，應(yīng)立即停止輸注。

注意事項

待檢紅細胞懸液不宜過稀或過濃;

所用的試劑必須在有效期內(nèi);

氣溫較高時，為防止標(biāo)本干涸所致的假陽性，可將玻片放入有一濕棉球的平皿中。若室溫過低，可將玻片置于28℃右右的溫箱中;

注意區(qū)分紅細胞的疊連現(xiàn)象與凝集現(xiàn)象。前者滴加生理鹽水1~2滴混勻后，紅細胞即可分散成渾濁狀，而后者則不因此而改變;

利用已知A型和B型紅細胞與一系列稀釋的待檢血清作凝集反應(yīng)，根據(jù)凝集效價(以出現(xiàn)凝集的最高稀釋度)的高低可作為判斷體液免疫功能的一項指標(biāo)。多數(shù)免疫功能正常的半歲嬰兒，除AB型外，血清中相應(yīng)的抗A效價≥1:8，抗B效價≥1:4。一歲后，凝集效價也相應(yīng)提高。